2 短期瘤胃法
    Bell(1953)建立了“一級離體消化法”，該法是以試管培養(yǎng)瘤胃液和飼料樣品，模擬瘤胃消化評定飼料的可消化性，并用此法進行了羊飼料的營養(yǎng)價值評定。Tilley和Terry(1963)在此基礎上提出了改進后的兩步法。即將飼料在瘤胃液中培養(yǎng)48h后再用胃蛋白酶培養(yǎng)48h，以模擬真胃和部分小腸的消化過程，培養(yǎng)結束后分離出殘渣進行分析。進一步改進改用纖維素酶代替瘤胃液，第一階段用纖維素酶，第二階段用胃蛋白酶，此法經(jīng)過大量實驗證明與傳統(tǒng)的體外法所得到的結果相似。

 Yahaya等(2001)應用體外兩步法來評定3種熱帶樹嫩枝葉飼料的消化率和降解率，以求評價這些飼料能否作為小反芻動物長期供應的單一日糧或補充日糧。但兩步法不能測定牧草的動態(tài)消化率。因發(fā)酵終產(chǎn)物不能外移，與反芻動物瘤胃食糜外排的生理規(guī)律不相符，也影響測定結果的穩(wěn)定性和準確性。
3 人工瘤胃持續(xù)發(fā)酵法(長期瘤胃法)
    人工瘤胃持續(xù)發(fā)酵法與體外產(chǎn)氣法相比，能更準確的模擬瘤胃環(huán)境。該法可將人工瘤胃中產(chǎn)生的發(fā)酵產(chǎn)物持續(xù)排出，以維持發(fā)酵罐內穩(wěn)定的環(huán)境，且保持幾周的穩(wěn)定發(fā)酵，是評定飼料動態(tài)降解率較好的實驗方法。任鵬和馮仰廉(1989)用長期瘤胃發(fā)酵法測定了6種餅粕飼料蛋白質的降解率，其測定結果的穩(wěn)定性優(yōu)于尼龍袋法，平均變異系數(shù)為2.7%，結果與尼龍袋法的結果高度相關(R2=0.99)。持續(xù)發(fā)酵法還可研究體外碳水化合物發(fā)酵規(guī)律，進行消化率、VFA產(chǎn)量、氨濃度、微生物蛋白合成量等指標的綜合評定。因仍需要對實驗動物安裝瘺管且操作繁瑣，用作蛋白質降解率的常規(guī)評定方法受到了一定的限制。目前較為成功的裝置有Czerawski(1986)建立的Rusitec、Hoover(1989)研制的CC、王加啟和馮仰廉(1993)研制的瘤胃持續(xù)模擬裝置(RSI)等。人工瘤胃裝置沒有象瘤胃壁那樣的半透膜來吸收產(chǎn)物，可能是該法與體內法在發(fā)酵時出現(xiàn)矛盾的地方。盡管如此，該方法對瘤胃代謝和反芻動物飼料的研究很有價值。
4 酶解法
    酶解法是用酶溶液代替瘤胃液對飼料營養(yǎng)價值進行評定的一種方法。目前主要有單-胃蛋白酶或單-纖維素酶酶解法和蛋白酶-纖維素酶的復合酶解法。20世紀80年代以來，國內外越來越重視利用酶解法評定蛋白質降解率的研究。熊文中(1989)報道，用酶解法測定反芻動物飼料有機物質降解率和評定飼料的營養(yǎng)價值具有一定的可靠性。酶解法的最大優(yōu)點是不需要動物作為實驗供體。顏品勛(1995)用胃蛋白酶酶法評定青粗飼料蛋白質降解規(guī)律，以尼龍袋法結果作參照，結果表明，用單一胃蛋白酶法能較好地估測瘤胃尼龍袋法蛋白質降解率。如果對粗飼料進行分類估測，則可明顯提高酶解法與尼龍袋法的相關。Kopecny等(1998)在對瘤胃未降解蛋白中蛋白質消化率的研究中發(fā)現(xiàn)，尼龍袋法和酶解法有較高的相關性，且均與體內法的相關性較高。李樹聰?shù)?2001)研究表明，由于酶的特異性，用單一酶或少數(shù)幾種酶構成的復合酶很難模擬瘤胃中微生物對蛋白質的復雜消化過程。酶解法的優(yōu)點還有：不需要瘺管動物、定環(huán)境易于標準化、穩(wěn)定性高、實驗室之間可比性強、能大批量進行操作、效率高、成本較低。酶法所得到的結果往往不能很真實地反映體內的情況。
5 溶解度法
    溶解度法是根據(jù)飼料在緩沖溶液或相似溶劑中的溶解度來評定飼料蛋白質降解率的方法。
    常用溶劑有熱蒸餾水、硼酸-磷酸鹽溶液、70%乙醇、Burrough緩沖液、McDougal、人工唾液、NaCl溶液和蒸煮過的瘤胃液等。同一種蛋白質在不同溶劑中的溶解度不同，受到溶劑的化學組成、離子濃度、濕度和pH的影響，這使得溶劑的選擇變得很困難，從而使其在應用上受到一定限制。
6 近紅外反射光譜技術(NIRS)
    NIRS的原理是在0.7~2.5μm這段近紅外光譜區(qū)內，飼料有機成分對近紅外光有選擇性的吸收，不同有機成分的吸收光譜不同，各種成分有著各自特征頻率和特征吸收譜帶。同一成分也因含量高低而對近紅外光的吸收強弱有一定差別，特征吸收譜帶的強度與有機成分含量成正比關系。根據(jù)飼料中的有機成分對近紅外光的特征吸收，建立光譜值與含量之間的相關關系。丁麗敏等(2002)就NIRS和粗蛋白質預測氨基酸含量的精度進行了比較研究，證明NIRS的預測性能優(yōu)于以粗蛋白質為自變量的預測方程的預測性能，在預測氨基酸含量方面具有其他方法無可比擬的優(yōu)勢。穆懷彬(2008)研究表明，采用近紅外技術對青貯玉米營養(yǎng)品質、青貯品質、粗飼料品質的綜合研究，均具有較好的判斷效果，大大簡化了常規(guī)分析方法，可以實現(xiàn)對常規(guī)分析方法的取代，近紅外技術是青貯玉米綜合品質的快速檢測手段。NIRS估計飼料營養(yǎng)物質消化率必須建立在大量的準確的原始數(shù)據(jù)之上，否則估測值將與實測值差距很大；另外該技術本身在精度上不及濕法分析，但不同等級同類牧草之間存在的只是該方法帶來的系統(tǒng)誤差，具有相對可比性。

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